摘要:本论文主要研究使用的检测技术,替代国标慢速微生物检测方法,通过对比仪器法、国标平板法、美兰检测法检测数据的对比,引进高速方法更适合企业,提升检验结果的准确性,保证检验工作的及时性。
1 材料与方法
1.1 材料
仪器法:染色液(菌落)、清洗液。
菌落培养平皿及培养基。
3M菌落总数检测纸片。
美兰染色液。
1.2 主要操作步骤
(1)选取lmL牛奶样品添加到样品杯中,再加入2mL染色液(菌落和体细胞染色液不相同;
(2) 将样品杯放入孵化器孵化(菌落孵化10分钟,第l 分钟和第9分钟需要快 声,体细胞孵化l分钟,无需快 声);
(3)将孵化好的样品放仪器取样管下,在软件中操作进行检测;
(4)结果在吸样后的1分钟内得出结果。
1.3 仪器检测原理:
菌落模块工作原理:通过化学物质、快 声波和热处理过程对牛奶中的生物性干扰成分(脂肪、蛋白、体细胞等)进行降解,通过化学物质和快 声波处理破坏菌落团块以计数单个菌落,通过荧光剂对菌落的DNA(去氧核糖核酸)和RNA (核糖核酸)进行染色(染被进入DNA 的双链螺旋结构) ,致使荧光信号明显增强。在菌落逐个通过流式细胞室时检测菌落荧光信号,经操作软件计算后得出以CFU/mL为单位的菌落总数值。
2 验证数据及分析
2.1 菌落总数比对实验
仪器法和美兰法对比,共检测103组样品对于大多数样品美兰法结果高于仪器法,总符合率为29.1% ,对于美兰法小于50万的样品的符合率较高, 美兰法检测结果越高,其符合率越低,
按照微生物不同方法检测的要求,对于同一样本采用不同方能检测,取10g值之差的绝对值<0.45 ,即认为两种方法没有明显差异。通过数据可以看出, 对于大多数样品仪器法结果高于平板法,总符合率为74.0%。
3 结论
仪器法对菌落总数的检测结果居于美兰法和平板法之间,比美兰法更接近于平板法,是三种方法中速的方法,更加适用于生乳收购在线高速检验,但需要定期校正曲线以保证检验的准确性。
来源:惠合UHT灭菌机网